viernes, 15 de mayo de 2009

PRE ANALITICA 8= Aglutinación

*MATERIALES

-lamina de cristal para reacciones febriles



- tubo de ensaye con tapón rojo estéril

-palillos de madera

-torundas de algodón alcoholizadas

- centrifuga



- microscopio



- pipeta Pasteur con bulbo



- papel secante

- papel para vestir mesa

- reactivo febriclin

- paciente “sangre fresca”

-torniquete




1. Hoja de solicitud de examen
2. Hoja de laboratorio
3. Hoja para paciente



ETAPA ANALITICA
• Técnica de extracción de sangre (veno punción)
• Separación de paquete sanguíneo y plasma
• Punteo de plasma en placa de cristal
• Mezclar plasma con reactivo de febriclin para observación de reacciones de aglutinación
• Observar macroscópicamente el proceso de aglutinación en objetivo 10- 40x
• Reportamos en hoja de laboratorio

CLASE

ENTEROBACTERIAS
1. Paramecium
2. Escherichia coli
3. Salmonella
4. Proteus
5. Brucella abortus
6. Prueba de aglutinación
Enfoque 100x
• Saliva
• Excremento
• Hb
• Orina
• Dermis

TECNICAS:
1. Objetivo
2. Técnica de autoclave
3. Cultivos
4. Pie de rey colonias de microorganismos
5. Frotis
6. Tinción de gran con alcohol, cetona cristal violeta, safranina, yodo lugol
7. Enfoque 100x




PRE ANALITICA Y POST ANALITICA
Practica I. Operar equipo y materiales de laboratorio asa como elaborar medios de cultivo.

- Etapa pre analítica


*practica 1. Elaborar medio de cultivo
*practica2. Esterilización de medios de cultivo
*practica3. Siembras en estría de medios de cultivo
*practica 4. Observación del desarrollo de m.o en medios de cultivo, lectura de frotis para tinción
*practica 5. Elaborar frotis para tinción
*practica 6. Tinción de gran
*practica 7. Observación microscópica
*practica 8. Prueba de reacciones febriles para prueba de aglutinación en serología.
*practica 9. Prueba de aglutinación en sangre fresca utilizando tubo con anticoagulante.

TAREA 4. 3er Parcial

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial y de Servicios No.155
(LABORATORIO CLINICO)



MODERNIZACIÓN Y MANTENIMIENTO DE EQUIPOS PARA LABORATORIOS EXPERIMENTALES Y AULAS


BITÁCORA DE FALLA Y SEGUIMIENTO DE MANTENIMIENTO CORRECTIVO A EQUIPO DE LABORATORIO




División: P54F02
Departamento:
Nombre del Laboratorio: laboratorio UPS (Unidos Por la Salud)

SEGUIMIENTO POR EL RESPONSABLE DE LABORATORIO
"Actividad
(no aplica para laboratorio abierto)"
Fecha 15/mayo/2008

Equipo

Inventario del equipo

Tipo de falla detectada

Usuario que reporta la falla

Fecha de entrega dd/mm/aaaa

Fecha de recepción dd/mm/aaaa

Equipo en garantía (SI ó NO)

Costo aproximado de la reparación

Razón social de la empresa que realizó el mantenimiento

Supervisó operación correcta

x Docencia

Investigación
Curso
Proyecto Nombre Nombre y Firma.
Docencia
______________________________________________________________
Investigación
Curso
Proyecto Nombre Nombre y Firma.
Docencia
______________________________________________________________
Investigación
Curso
Proyecto Nombre Nombre y Firma.
Docencia
______________________________________________________________
Investigación
Curso
Proyecto Nombre Nombre y Firma.
Docencia
______________________________________________________________
Investigación
Curso
Proyecto Nombre Nombre y Firma.
Docencia
______________________________________________________________
Investigación
Curso
Proyecto Nombre Nombre y Firma.
Docencia
______________________________________________________________
Investigación
Curso
Proyecto Nombre Nombre y Firma.
Docencia
______________________________________________________________
Investigación
Curso
Proyecto Nombre Nombre y Firma.

______________________________________________________________

Elaboró

Enterado







______________________ ____________________________
JEFE DE DEPARTAMENTO RESPONSABLE DE LABORATORIO
Nombre y Firma Nombre y firma

miércoles, 13 de mayo de 2009

TAREA 3. 3er Parcial

TAREA 3.
 Investigar el concepto de tinción
 Clasificación de tinciones
 Tinción directa
 Tinción indirecta
 Tinción por azul de metileno o cristal violeta
 Tinción de Grahm
 Tinción de Ziehl Neelsen

TincionExisten múltiples métodos de tinción histológica, unos generales y otros específicos, que permiten poner de manifiesto tanto la topografía tisular, como tipos celulares concretos, determinados orgánulos o estructuras intracelulares.
Las tinciones histológicas propiamente dichas utilizan colorantes, la mayor parte de ellos derivados de la industria textil, que se eligen en función de su capacidad de interaccionar con los diferentes constituyentes de los tejidos. Técnicas de tinción más complejas como las histoenzimáticas o inmunocitoquímicas se basan en el empleo de sustratos, lectinas, anticuerpos, etc.

Tincion directaEn una tinción directa el colorante interacciona directamente con el sustrato.

Tinción indirecta
En una tinción indirecta se hace interaccionar en primer lugar a una sustancia química denominada "mordiente" con el sustrato la cual permite la posterior interacción del colorante. Usualmente los mordientes son sales, hidróxidos o alumbres de metales bivalentes o trivalentes.

Tinción por azul de metileno o cristal violetaEl azul de metileno es un buen colorante simple que actúa sobre todas las células bacterianas rápidamente y que no produce un color tan intenso que oscurezca los detalles celulares. Es especialmente útil para detectar la presencia de bacterias en muestras naturales, puesto que la mayor parte del material no celular no se tiñe.


Tinción de Gram
La tinción de Gram o coloración Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color violeta y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa.


Tinción de Ziehl Neelsen
La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, para la identificación de mocroorganismos patógenos, por ejemplo M. tuberculosis.
Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes, Franz Ziehl (1859 to 1926), un bacteriólogo y Friedrich Neelsen (1854 to 1894), un patólogo.
Este método se basa en que las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (por ejemplo, el ácido micólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan bacilos ácido-alcohol resistentes o BAAR. Las micobacterias como M. tuberculosis y M. marinum y los parásitos coccídeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras.

TAREA 2. 3er Parcial


TAREA 2.
• Concepto de medio de cultivo.
• Clasificación de medios de cultivo.
3. Tipos de siembras
Medio de cultivo
Solución que cuenta con los nutrientes necesarios para recuperar, multiplicar, aislar e identificar los microorganismos (bajo condiciones favorables de temperatura y pH), así como efectuar pruebas de susceptibilidad. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados, al prepararse podemos encontrarlos en estado sólido, semisólido y líquido.
CLASIFICACION.
Según su aspecto físico:
• fosiferoliquidos
• Semi-sólidos
• Sólidos duros o muy duros
Según su uso:
• Selectivos
• Selectivos de enriquecimiento
• Diferenciales
• Para cultivar gérmenes anaerobios
• Para medir potencia de antibióticos
• De transporte en micro
• Para filtración a través de membrana
• Para cultivo de hongos y levaduras
• Para cultivo de protozoarios

TAREA 1. 3er Parcial

Tarea 1.
1. Investigar bibliográficamente y de forma digital las características del microorganismo denominado: Paramecio que pertenece al grupo de los protozoarios.
Paramecium
Los paramecios (género Paramecium) son protozoos ciliados con forma de suela de zapato o elipsoide, habituales en aguas dulces estancadas con abundante materia orgánica, como charcos y estanques. Son probablemente los seres unicelulares mejor conocidos y los protozoos ciliados más estudiados por la Ciencia. El tamaño ordinario de todas las especies de paramecios es de apenas 0'05 milímetros.
Carecen de flagelos, pero los cilios son muy abundantes y recubren toda su superficie. A ellos les corresponde proporcionar movimiento al organismo. La membrana externa absorbe y expulsa regularmente el agua del exterior con el fin de controlar la osmorregulación, proceso dirigido por dos vacuolas contráctiles.
En su anatomía destaca el citostoma, una especie de invaginación situada a todo lo largo del paramecio de la que éste se sirve para capturar el alimento, conformado por partículas orgánicas flotantes y microorganismos menores. El citostoma conduce a una cito faringe antes de que el alimento pase al interior de este protozoo. Otros orgánulos de fácil observación son el núcleo eucariota, situado junto a un "micro núcleo" en el centro del paramecio, y las vacuolas digestivas, que digieren constantemente el alimento capturado. Los desechos se expulsan por exocitosis, mediante vacuolas de secreción que se originan a partir de las digestivas.
Como muchos otros microorganismos, los paramecios se reproducen asexualmente por fisión binaria.


2. Investigar las características de los siguientes microorganismos pertenecientes al grupo de las entero bacterias:
a) Escherichia coli
b) Salmonella tiphy
c) Proteus
d) Brucella abortus

Escherichia coli
Escherichia coli (E. coli) es quizás el organismo procarionte más estudiado por el ser humano, se trata de una bacteria que se encuentra generalmente en los intestinos animales y por ende en las aguas negras. Fue descrita por primera vez en 1885 por Theodore von Escherich, bacteriólogo alemán, quién la denominó Bacterium coli. Posteriormente la taxonomía le adjudicó el nombre de Escherichia coli, en honor a su descubridor. Ésta y otras bacterias son necesarias para el funcionamiento correcto del proceso digestivo. Además produce vitaminas B y K. Es un bacilo que reacciona negativamente a la tinción de Gram (gramnegativo), es anaeróbico facultativo, móvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo), no forma esporas, es capaz de fermentar la glucosa y la lactosa y su prueba de IMVIC es ++--.
Es una bacteria utilizada frecuentemente en experimentos de genética y biotecnología molecular.



Salmonella tiphy

Salmonella spp. Es un bacilo Gram-negativo, móvil.
Está ampliamente presente en todos los animales.
Sus fuentes ambientales incluyen: agua, insectos, alimentos y superficies tanto de fábricas, cocinas, etc.
Salmonella es un género de bacteria que pertenece a la familia Enterobacteriaceae, formado por bacilos gramnegativos, anaerobios facultativos, con flagelos perítricos y que no desarrollan cápsula ni esporas. Son bacterias móviles que producen sulfuro de hidrógeno (H2S). Fermentan glucosa por poseer una enzima especializada, pero no lactosa, y no producen ureasa.
Es un agente zoonótico de distribución universal. Se transmite por contacto directo o contaminación cruzada durante la manipulación, en el procesado de alimentos o en el hogar, también por vía sexual.
Algunas salmonellas son comunes en la piel de tortugas y de muchos reptiles, lo cual puede ser importante cuando se manipulan a la vez este tipo de mascotas y alimentos.

Proteus
Proteus es un género de bacterias gramnegativas, que incluye patógenos responsables de muchas infecciones del tracto urinario.1 Las especies de Proteus normalmente no fermentan lactosa por razón de tener una β galactosidasa, pero algunas se han mostrado capaces de hacerlo en el test TSI (Triple Sugar Iron). Son oxidasa-negativas y ureasa-positivas. Algunas especies son mótiles.2 Tienden a ser organismos pleomórficos, no esporulados ni capsulados y son productoras de fenilalanina desaminasa.3 Con la excepción de P. mirabilis, todos los Proteus reaccionan negativos con la prueba del indol. Proteus es un género de bacterias ubicuo, residentes del tracto intestinal del hombre y otros animales.
Crecen en medios corrientes y moderadamente selectivos a temperatura corporal de 37ºC. Crecen formando capas diseminadas por virtud de su gran motilidad. Existen variantes inmóviles que forman colonias lisas.


BRUCELLA ABORTUS
La brucelosis, también conocida como fiebre de Malta, es una enfermedad infecciosa que se presenta con episodios recurrentes de fiebre, debilidad, sudoración y dolores vagos. Es provocada por una bacteria llamada Brucella, que está en la sangre, las secreciones y la leche de vacas, cerdos, ovejas y cabras. Brucella abortus es el microorganismo implicado con mayor frecuencia en la brucelosis bovina y es poco frecuente en nuestro país. La Brucella tiene capacidad de sobrevivir en el interior de las células fagocíticas. Este hecho determina la clínica característica, el curso ondulante, su tendencia a presentar recaídas y su frecuente evolución a formas crónicas.
B. abortus es una bacteria Gram negativa con un lipopolisacárido (LPS) fuertemente inmunodominante, el que junto con la capacidad de sobrevivir en el interior de células fagocíticas constituyen sus principales factores de virulencia. La infección en humanos conduce a una enfermedad con tendencia a la cronicidad, con fiebre y malestar recurrentes que deterioran su calidad de vida y que además puede presentar complicaciones como artritis, meningitis, entre otras.

viernes, 8 de mayo de 2009

PRACTICA. PIPETEO

*Índice:


-Objetivo de la práctica
-Introducción
-Desarrollo de la práctica
-Bitácora
-Conclusión

*Objetivo:
Esta práctica tiene como objetivo, que nosotros los alumnos pongamos en práctica los conocimientos anteriormente vistos y aprendamos a medir cantidades en volumen, así como el manejo adecuado de pipetas, probetas y matraces, ya que será lo que posteriormente utilizaremos mas adelante

*Introducción:
En esta práctica llamada “Pipeteo” realizaremos algunos procedimientos que nos sirven para mejorar las perfecciones de medidas y como utilizar las pipetas volumétricas y automáticas, así como saber medir bien los mililitros y aprender a pipetear sustancias que en este caso fue agua.

*Material:
-Probeta graduada 25ml
-Probeta graduada 100ml
-Matraz erlenmeyer 250ml
-Pipeta Pasteur
-Pipeta graduada volumétrica 10ml
-Pipeta volumétrica 5ml
-Pipeta automática
-Pipeta volumétrica de 1000ml
-Lóbulo
-Agua

*Marco teorico
-Procedimiento: Cada uno de los integrantes realizara la misma actividad, se pipeteara con las 5 pipetas entregadas y se colocara la muestra del liquido en la probeta, se pipetearan desde 1ml hasta 5 ml. Una vez hecho eso se colocara una gota de cada pipeta en una caja de petri y se compararan sus tamaños.

-Nota: Pipeta Pasteur, se aprieta el lóbulo para succionar el agua contenida en el matraz Erlenmeyer hacia la probeta, al utilizarla 5 veces se llego a los 3 ml

-Pipeta volumétrica ( 1ml): Se succiona el agua con la boca, después lo colocamos en la probeta graduada y comprobamos que aspira mas realmente 1 ml de agua

-Pipeta volumétrica (5ml): Se succiona con la boca, sostenemos con el menisco, soltamos y ponemos el agua en la probeta comprobando que si son 5ml exactos.
-Pipeta graduada (10ml): Se aspira el agua, de igual modo sostenemos con el menisco hasta el 10, luego colocamos el líquido en la probeta donde comprobamos que son 10 ml

-Comparación de gotas:
1.- Pipeta Pasteur (gota mas pequeña)
2.- Pipeta automática en 10micro litros (gota mediana pequeña)
3.- Pipeta graduada de 1ml (gota mediana)
4.-Pipeta volumétrica 5ml (gota mediana, grande)
5.- Pipeta graduada volumétrica 10ml (grande)

*Bitácora:
-Colocación del equipo de bioseguridad………………………..5min
-Explicación del profesor…………………………………………10min
-Recolección de material…………………………………………5min
-Realización de practica………………………………………….1hora
-Retirar equipo de bioseguridad………………………………..5min


*Conclusión:
Esta practica como todas las demás ya realizadas son importantes pues aprendemos nuevas cosas que nos serán de gran ayuda mas adelante, en este caso, el pipeteo de sustancias asi como aprender a utilizar correctamente los materiales como las pipetas y saber medir correctamente las cantidades.